337p粉嫩大胆色噜噜噜,欧美巨大粗爽av在线观看,久久99精品久久久久婷婷,麻豆md0077饥渴少妇

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 原代細胞培養(yǎng)與操作方法
原代細胞培養(yǎng)與操作方法
點擊次數(shù):1908 更新時間:2021-01-13

原代細胞的培養(yǎng):

原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì),如果是正常細胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實際上,通常把第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。

原代細胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。

組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上,加入培養(yǎng)基后進行培養(yǎng)。

分散細胞培養(yǎng)大致步驟為:

將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。

原代細胞操作方法:

(1)取成年新西蘭大白兔,耳緣靜脈注射空氣處死后,取下兔子的雙腿,立即用75%乙醇浸泡。

(2)移入細胞房內(nèi),去除雙腿表面的皮毛及肌肉,剪取關(guān)節(jié)段,移至超菌工作臺內(nèi)。

(3)PBS洗滌數(shù)次,用手術(shù)刀或彎剪將關(guān)節(jié)表面的軟骨組織取下。

(4)軟骨組織塊靜置5min,棄去上層液體及懸浮組織,將軟骨組織剪成1mm3的大小。移到離心管中加3倍體積的0.25%胰蛋白酶,置入37℃的恒溫搖床中,振蕩消化15-20min;

(5) 4℃靜置5min;棄上清,PBS洗滌,去上清。加入0.2%膠原酶II,置入37℃的恒溫搖床中,振蕩消化2H;
(6)加入生長培養(yǎng)基終止消化,反復(fù)吹打后依次通過200目濾網(wǎng)。收集濾液,1200rpm離心8min,棄上清,用DMEM*培養(yǎng)基重新懸浮細胞, 放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

(7)細胞傳代后放入預(yù)置有薄骨片或蓋玻片的培養(yǎng)板中進行培養(yǎng)。細胞*展開后即可固定做原代鑒定。

天天澡天天狠天干天啪啪图片| 含着jing液去上课h| 太紧了夹得我的巴好爽| 国产精品久久一区二区三区| 成人免费无遮挡无码黄漫视频| 色国产色无码色欧美色在线| 97精品一区二区视频在线观看| 亚洲av无码一区二区二三区| 双性美人被调教到喷水a片| 东京热网站| 第一次处破女18分钟好痛| 亚洲精品国产精品乱码视色| 亚洲av在线观看| 亚洲精品无码高潮喷水a片小说| 女生迈开腿让男生打扑克| 成熟女人优雅涵养说说| 亚洲无线码一区国产欧美国日产 | 3d动漫精品啪啪一区二区免费| 影音先锋资源站| 欧美av| 午夜福利在线观看| 车上麻麻用裙子挡着做h| 巨大黑人极品videos精品| 国产高清无密码一区二区三区| japanese酒醉侵犯| 欧美性生交18xxxxx无码| 亚洲av综合色区无码一二三区| china中国bingo视频| 亚洲国产精品无码久久A片小说| 灌牛奶cao哭男男腐纯肉打屁股| 老女人重囗味456| 亚洲中文无码亚洲人成软件| 一女三男做2爱a片免| 网禁拗女在稀缺视频网站| 无码人妻一区二区三区在线| 娇小萝被两个黑人用半米长| 护士人妻hd中文字幕| 久久兔费黄a级毛片高清| 老妇性hqmaturetube| 人妻熟女一二三区夜夜爱| 被几个领导玩弄一晚上|